Classic Cell Culture Media の紹介、メディアの選び方は？

DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12 など、多くの種類の従来の細胞培養培地が最も広く使用されています。 M199、IMDM、L15 培地などの他の培地も、特定の細胞の培養に使用されます。 これらの細胞培養用培地の特徴と用途は以下の通りです。

1. BME 細胞培養液

1955年にイーグル社が考案したベーシックイーグル培地は、BSS＋12種類のアミノ酸＋グルタミン＋8種類のビタミンを含んでいます。 シンプルで追加が簡単で、さまざまな継代細胞株や特別な研究用途に適しており、これに基づいて、MEM、DMEM、IMDM などの改良された種類の細胞培養培地が作成されます。

2. MEM 細胞培養液

これを1959年のイーグル基本培地（BME）に改良し、リジンとビオチンを取り除き、アミノ酸濃度を高めました。 ただし、栄養成分が限られているため、生産に特化した細胞培養に最適な培地とは限りません。

3. DMEM 細胞培養液

DMEM は、最初はマウス線維芽細胞用に設計された、Dulbecco によって変更されたイーグル培地です。 DMEM は MEM の 3 倍のアミノ酸濃度、MEM の 2 倍のビタミン濃度を持ち、より良い緩衝のために 1000 倍の HCO4500- および COXNUMX 濃度を使用します。 元の製剤には XNUMX mg/L のグルコースが含まれていましたが、後に特定の細胞の増殖のために XNUMX mg/L に調整されました。これは、しばしば低グルコースおよび高グルコースと呼ばれます。

低糖は依存性接着細胞培養、特に増殖速度が速く接着性が低い腫瘍細胞培養に適しています。 高糖度は、高密度懸濁細胞培養、付着力が弱いが元の成長点から切り離したくないクローン培養、骨髄腫細胞およびハイブリドーマで DNA をトランスフェクトされた形質転換細胞の培養に適しています。

4. IMDM 細胞培養液

Guilber と Iscove は、赤血球とマクロファージ前駆体を培養するために、Dulbecco' Medium を Iscove's Medium に変更しました。 IMDM 細胞培養培地には、セレン、追加のアミノ酸とビタミン、ピルビン酸ナトリウム、および HEPES が含まれており、硝酸鉄を硝酸カリウムに置き換えています。IMDM は、マウス B リンパ球、LPS 刺激 B 細胞、骨髄造血細胞、T 細胞、 IMDM は非常に栄養豊富な培地であり、高密度細胞の急速な増殖に使用できます。

5. RPMI-1640 細胞培養液

ムーアらによって開発されました。 1967年ロズウェルパーク記念研究所にて、リンパ球培養用に設計されており、BSS＋21種類のアミノ酸＋11種類のビタミンを含んでいます。 現在では、哺乳類、特殊な造血細胞、正常または悪性に増殖している白血球、ハイブリドーマ細胞などの浮遊細胞培養にも使用されています。 K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9、T 細胞リンパ腫細胞、HCT-15 上皮細胞などの他の成体リンパ球を参照用に使用できます。

6. HamF10 細胞培養液

1963 微量元素を含むハム デザインは、血清含有量が低い場合に使用でき、クローン培養に適しています。 f10 は、ハムスターおよびヒト二倍体細胞に適しており、特に羊水細胞培養に適しています。

7. DMEM/F12 細胞培養液

Ham's F12 は、CHO 細胞を低血清濃度でクローニングするために設計されており、現在ではクローン形成率や初代培養の解析に広く使用されています。 F12 は、DMEM やその他のボリュームと併用して、多様な製品の高濃度および組成を取得することもできます。 この培地は多くの初代培養に適用されており、細胞株の培養はより困難です。 また、栄養分が豊富で血清の使用量が少ないため、無血清培養の基本培地としてもよく使用されます。

8. M199 細胞培養液

M-199 培地は、モーガンらによって設計された定義済みの化学組成を持つ細胞培養培地です。 BSS以外に1950成分を含み、主にニワトリ胚線維芽細胞培養に用いられる総合培地です。 長期培養をサポートするために、m-53 培地に血清を補充する必要があります。 多くの種の起源の細胞を培養するために使用でき、トランスフェクトされた細胞を培養することができ、現在ではウイルス学およびワクチン生産に広く使用されています。

9. McCoy5A ミディアム

McCoy5A 培地は、肉腫細胞用に 1959 年に MeCoy によって設計された細胞培養培地であり、BSS および 40 の他の成分を含んでいます。 さまざまな初代移植片（骨髄、皮膚、肺、脾臓など）の増殖をサポートでき、一般的な初代移植に加えて、主に組織生検培養、一部のリンパ球培養、一部の難培養細胞の増殖補助に使用されます。細胞培養 — たとえば、Jensen ラット肉腫線維芽細胞、ヒトリンパ球、HT-29、BHL-100、およびその他の上皮細胞。

10. L15 細胞培養液

L-15 培地は、急速に増殖する腫瘍細胞の培養に適しており、CO2 の非存在下で腫瘍細胞株を培養するために使用されます。 この培地は、アミノ酸組成をさらに改良し、グルコースをガラクトースに置き換えたリン酸緩衝系を使用しています。

細胞培養培地の選び方は？

1. 参考文献を確認したり、細胞株を購入する際に参照したりできます。 また、Cell Line Database ツールを備えた Invitrogen Web サイトなど、一部の生物学会社の Web サイトで検索することもできます。 関心のある細胞タイプを選択すると、推奨される培地、血清、トランスフェクション試薬などが表示され、最適化されたトランスフェクション手順が示される場合があり、非常に便利です。
2. また、他の研究室で使用されている通常の培地を参照することもできます。その多くは、複数の細胞の培養に適しています。
3. 細胞株の特性と実験のニーズに応じて培地を選択してください。 たとえば、マウスの細胞株はほとんどの場合、RPMI1640 が選択されます。
4. 目的の細胞を様々な培地で培養し、増殖状況を観察します。 増殖曲線やコロニー形成率などを指標に判断し、実験結果から最適な培地を選択します。最も客観的な方法ですが、手間がかかります。