HCY™ 96 DNA RNA抽出キット
もちろんです。詳しい情報をお伝えします。 HCY™ 96 DNA/RNA抽出キット.
これは、臨床診断、病原体検出、ゲノム研究など、大量のサンプルを処理する研究室で使用するために設計されたハイスループット核酸抽出キットです。
ここでは、その機能、原理、一般的な手順、および用途について包括的に説明します。
概要
当学校区の HCY™ 96 DNA/RNA抽出キット 磁気ビーズベース 浄化システムフォーマット 96ウェルプレート同時に精製することができる DNAとRNAの両方 自動化または半自動化されたワークフローにおいて、単一サンプルから複数の標的を検査することが可能です。これは、病原体検出(例:SARS-CoV-2、インフルエンザ、RSウイルス)など、単一サンプルから複数の標的を検査することが一般的に行われるアプリケーションにとって非常に重要です。
他社とのちがい
- 高スループット: 96ウェルプレート用に設計されており、96サンプルの同時処理に最適です。自動液体ハンドリングプラットフォームおよび磁気ビーズプロセッサーと互換性があります。
- デュアル抽出: 両方を効率的に抽出 ゲノムDNAと全RNA 単一のサンプルライセートから、時間、試薬、サンプル材料を節約できます。
- 磁気ビーズ技術: シリカベースの磁性ビーズマトリックスを用いて核酸を結合します。この方法は、従来のスピンカラム法と比較して、高い純度、収量、そして自動化の容易さで知られています。
- 高純度と高収率: 最適化されたバッファーと洗浄ステップにより、タンパク質、塩、その他の汚染物質などの阻害物質が除去され、繊細な下流アプリケーションに適した高品質の DNA と RNA が生成されます。
- 迅速な手順: 使用される自動化装置に応じて、96 ウェル プレート全体のプロセスは 20 ~ 40 分で完了します。
- 幅広いサンプル互換性: 次のようなさまざまなサンプル タイプで使用できます。
- スワブサンプル(鼻咽頭、口咽頭)
- 血清/血漿
- 細胞培養上清
- 組織ホモゲネート
- 体液
方法の原理
このキットは次のような原理で動作します シリカ磁性ビーズ核酸精製:
- 溶解: サンプルは強力なカオトロピック塩緩衝液(通常はグアニンHClまたはグアニンチオシアネートを含む)で溶解されます。この緩衝液はタンパク質を変性させ、ヌクレアーゼ(RNaseおよびDNase)を不活性化し、核酸(DNAおよびRNA)を溶液中に放出します。
- バインディング: 溶解バッファーと結合溶液の存在下で、核酸はシリカコーティングされた磁性ビーズの表面に特異的に結合します。カオトロピック塩は水の構造を破壊し、核酸の負に帯電したリン酸骨格が正に帯電したシリカ表面と相互作用することを可能にします。
- 捕獲と洗浄: 磁気スタンド(または自動化システムでは磁気ロッド)を用いて、ビーズ-核酸複合体をチューブ/プレートの壁に固定します。上清を除去し、エタノールを含む洗浄バッファーでビーズを2~3回洗浄します。この洗浄により、核酸を溶出させることなく、塩、タンパク質、脂質などの不純物が除去されます。
- 溶出: 残留エタノールを除去するための最終洗浄と完全な乾燥後、低塩緩衝液(例:TE緩衝液またはヌクレアーゼフリー水)を用いてビーズから純粋な核酸を溶出します。溶出緩衝液はシリカと核酸の相互作用を阻害し、核酸を最終的な清浄な溶液中に放出します。
典型的なワークフロー(簡略化)
- 溶解液の準備: サンプルをプロテアーゼK(必要に応じて)および溶解バッファーと混合し、溶解が完了するまでインキュベートします。
- 練る: ライセートを96ウェルディープウェルプレートに移し、磁気ビーズと結合溶液を加えます。核酸がビーズに結合するようによく混合します。
- キャプチャー: プレートを磁気スタンドに置き、溶液が透明になるまで待ちます。上清を吸引して捨てます。
- 洗浄1: 洗浄バッファー 1 を加え、混ぜてビーズを再懸濁し、磁石に捕捉して上清を捨てます。
- 洗浄2: 洗浄バッファー 2 を加えて混合し、上清を回収して廃棄します。
- ドライ: ビーズペレットを数分間空気乾燥させて、洗浄バッファーからエタノールがすべて蒸発したことを確認します。
- 溶出: 溶出バッファーを加え、よく混合し、数分間インキュベートしてビーズを捕捉します。上清には精製されたDNA/RNAが含まれており、新しいプレートまたはチューブに移します。
下流アプリケーション
このキットで抽出された高品質の DNA と RNA は、幅広い高感度分子生物学アプリケーションに適しています。
- リアルタイムRT-PCR(qRT-PCR): 主な用途は、特にウイルス検出(COVID-19 検査など)です。
- PCR法
- 次世代シーケンシング (NGS)
- マイクロアレイ解析
- クローニング
- 分子診断
製品概要
当学校区の HCY™ 96 DNA/RNA抽出キット 効率性、拡張性、信頼性が求められる現代の分子生物学研究室にとって、強力なツールです。磁気ビーズを用いた96ウェルフォーマットは、ハイスループット診断・研究ラボの業界標準であり、重要な下流分析のための核酸を迅速かつ正確に調製することを可能にします。
お断り: 最も正確で具体的なプロトコルについては、キットに付属するメーカーの公式マニュアルを必ず参照してください。
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