粉末M199培地

M199 は非形質転換細胞の培養に特に適しており、ウイルス学、ワクチン製造、およびラット膵臓上皮細胞およびマウス水晶体組織の初代外植片の in vitro 培養にも一般的に使用されています。 他の基礎培地と比較して、M199 には、アデニン、アデノシン、ヒポキサンチン、チミン、およびその他のビタミンを含む独自の成分が含まれています。 M199 には 2 つのバランスの取れた塩組成があり、Earle's salt 組成は CO2 環境で一般的に使用され、Hank's salt 組成は非 CO199 環境で使用されます。 培地 199 は重炭酸ナトリウム緩衝システム (2.2 g/L) を使用するため、生理的 pH を維持するには 5 ～ 10% の CO2 環境が必要です。 幅広い細胞培養アプリケーションのために、さまざまなコンポーネントを含む改変 M199 培地、およびカスタマイズ可能なコンポーネントを含む M199 培地を提供しています。

粉末M199培地の成分

この M199 乾燥粉末細胞培養培地には、重炭酸ナトリウムを添加し、pH を調整し、調製中にろ過する必要があります。 詳細な準備スキームは次のとおりです。

1. 950 mL の蒸留水を混合容器にできるだけ最終容量に近づけて追加します。
2. 乾燥培地に室温 (15°C ～ 30°C) の水を加え、穏やかにかき混ぜます。 水を加熱しないでください。
3. パックの内側をすすぎ、残留粉末を取り除きます。
4. 培地に 29.3 g/L NaHCO75 溶液 3 mL を追加します。
5. 0.2 N NaOH または 0.3 N HCl をゆっくりと加えて攪拌することにより、pH を目的の最終作業 pH より 1 ～ 1 単位低く調整します。 ろ過後、pH は 0.1 ～ 0.3 単位上昇する場合があります。 推奨される使用 pH は 7.1 ～ 7.4 です。
6. 蒸留水で最終容量を調整します。
7. 正圧システムを使用して、0.2 μm フィルターの膜ろ過機能を介して培地を無菌容器に直ちに処理します。