RPMI 1640 Medium (ロズウェルパーク記念研究所)

Rpmi-1640 培地はもともとリンパ球培養用に特別に設計されたもので、現在では HeLa 細胞、Jurkat 細胞、McF-7 細胞、PC12 細胞、PBMC 細胞、星状細胞、がんなど、さまざまな正常細胞およびがん細胞の培養に広く使用されています。細胞。 最も広く使用されているメディアの 1640 つです。 他の培地と比較した RPMI RPMI 1640 培地のユニークな効果は、還元剤のグルタチオンと高濃度のビタミンが含まれているという事実によるものです。 RPMI 12 培地には、Eagle の MEM や DMEM にはないビオチン、ビタミン BXNUMX、PABA が含まれています。

RPMI 1640培地の成分

L-グルタミン（グルタミン）

L-グルタミン (グルタミン) は細胞培養に不可欠な栄養素ですが、溶液中では不安定で自然に分解されます。 L-グルタミンの量は、L-グルタミンを含まない培地の研究ニーズに応じて任意に調整することができ、使用時に新鮮なL-グルタミンまたはその代替物を添加すると、細胞増殖により有益です。

L-アラニル-L-グルタミン (Ala-Glu) は、アラニル-グルタミンおよびアラニル-グルタミル ジペプチドとしても知られ、細胞培養培地中の L-グルタミンを直接置き換えることができる高度な細胞培養添加剤です。 l-グルタミンは細胞培養に不可欠な栄養素ですが、溶液中では不安定であり、溶液中では不安定であり、自発的に分解してアンモニアとピログルタミン酸を生成します。そのうちのアンモニアは細胞に有害ですが、L-アラニル- L-グルタミンは水溶液中で非常に安定しており、自然に分解しません。 細胞利用のメカニズムは、細胞培養中、細胞がペプチダーゼを培地に徐々に放出して、L-アラニル-L-グルタミルを L-アラニンと L-グルタミンに加水分解し、細胞がこれら XNUMX つの加水分解を取り込み利用することです。製品。 L-アラニル-L-グルタミルの細胞利用のプロセスは、低レベルの L-グルタミンが培地に継続的に添加されるという点で、フロー添加培養戦略に似ています。アンモニアは、細胞の増殖を助長します。 L-アラニル-L-グルタミルは、等モルの L-グルタミンを置き換えることができ、すべての細胞に適しており、適応をほとんど必要とせず、細胞培養時間を延長することができます。 また、細胞培養時間を延長し、継代数を減らすことができるため、時間と費用を節約できます。 L-グルタミンを添加した培地で培養した細胞は、L-グルタミンを添加した培地で培養した細胞よりもゆっくりとした活性の低下を示しました。 わずかに長い遅延期間は、ペプチダーゼの放出とジペプチドの消化に必要な時間によるものです。

NEAA（非必須アミノ酸）

L-アラニン、L-グルタミン酸、L-アスパラギン、L-アスパラギン酸、L-プロリン、L-セリン、グリシンの7つのNEAAであるNEAA（非必須アミノ酸）をMEM培地に添加すると、細胞培養中の細胞自身の非必須アミノ酸産生の影響を抑制し、細胞の増殖と代謝を効果的に促進します。

グルコースは、研究のニーズに応じて自由に調整でき、便利で迅速です。 高糖型培地は、増殖が速く接着性が低い細胞、ハイブリドーマのミエローマ細胞、クローン細胞、DNA 導入による形質転換細胞、各種初代ウイルス宿主細胞、単一細胞の培養やワクチン製造などに広く使用されています。 EPO を発現する CHO 細胞と B 型肝炎ワクチンの生産。 低糖培地は、代謝が遅く、接着依存性の細胞の培養により適しています。

HEPES は優れた生物学的緩衝液であり、細胞に毒性の影響はありません。 HEPES を含む培地は、一定の pH 範囲を長期間維持することができ、培養液の大きな pH 変動によって細胞増殖が悪影響を受けるのを効果的に防ぐことができます。 CO2フリーインキュベーターで使用できます。

フェノールレッドは、培地のpHを継続的に監視するために、培地のPH指示薬として使用されます。 フェノールレッドは、培地を低pHで黄色に、高pHで紫色に、細胞培養に最適なPH 7.2〜7.4で赤色にします。 ただし、フェノールレッドにはいくつかの欠点もあります。 研究によると、フェノールレッドはステロイドホルモン (特にエストロゲン) の効果を模倣できることが示されているため、エストロゲン感受性細胞 (乳房組織など) を使用する場合は、フェノールレッドを含まない培地を使用するのが最善です. フェノールレッドは、フローサイトメトリー解析中に検出を妨げる可能性があります。 さらに、一部の無血清培地処方にフェノールレッドが存在すると、ナトリウム-カリウムバランスが妨げられる可能性があります。

ペニシリン - ストレプトマイシン溶液

一般に「二重抗生物質」とも呼ばれるペニシリン-ストレプトマイシン混合物は、微生物汚染を防ぐために in vitro 培養で最も一般的に使用される抗生物質です。ペニシリンは細菌の細胞壁合成を妨害し、グラム陽性菌に対して特に効果的ですストレプトマイシンは、細菌のリボソームの 30S サブユニットに結合することによって細菌のタンパク質合成を阻害し、特に、ストレプトマイシンが細菌のリボソームの 30S サブユニットに結合して細菌のタンパク質合成を阻害するのに対して効果的であり、グラム陰性菌とグラム陽性菌の両方に対して有効です。しかし、グラム陰性菌に対して特に効果的です。 ペニシリンとストレプトマイシンの組み合わせは、細菌汚染のほとんどを防ぐことができます.

この製品は、アミノ酸、ビタミン、無機塩など、細胞の多重培養に必要な多くの成分を含んでいますが、タンパク質、脂質、成長因子は一切含んでいませんので、血清または無血清添加物と一緒に使用してください。

注意事項

この製品はろ過および除菌されており、汚染を避けるために無菌操作に注意して使用する必要があります。
製品を最大限に活用するために、製品を凍結融解しないでください。
この製品は、診断や治療ではなく、科学的研究またはさらなる研究の使用のみを目的としています。