PCR (ポリメラーゼ連鎖反応) の種類

ポリメラーゼ連鎖反応 (PCR) は、特定の DNA または RNA 配列を増幅するために使用される多用途の分子生物学技術です。 長年にわたり、さまざまな研究や診断のニーズに合わせて、さまざまなタイプの PCR が開発されてきました。 一般的な PCR のタイプをいくつか示します。

1. 従来の PCR: これは、変性、アニーリング、および伸長のサイクルを含む標準的な PCR 法です。 一般的な DNA 増幅、配列決定、およびクローニングに使用されます。
2. 逆転写 PCR (RT-PCR): RT-PCR は、RNA を相補 DNA (cDNA) に増幅するために使用され、遺伝子発現の研究​​によく使用されます。 一般的な XNUMX つのバリエーションには、RNA レベルを定量するための定量的 RT-PCR (qRT-PCR) と感度を高めるためのネステッド RT-PCR が含まれます。
3. リアルタイム PCR (qPCR): リアルタイム PCR では、増幅プロセス中に DNA または RNA を定量できます。 遺伝子発現解析、ウイルス量の定量化、ジェノタイピングに広く使用されています。
4. マルチプレックス PCR: マルチプレックス PCR は、単一の反応で複数の標的配列を増幅します。 これは、複数の病原体を検出したり、複数の遺伝子座を同時に遺伝子型解析したりする場合に役立ちます。
5. ネストされた PCR: ネステッド PCR には XNUMX ラウンドの増幅が含まれ、最初の PCR の産物が XNUMX 番目の PCR のテンプレートとして機能します。 特に分解された DNA や低コピー DNA を扱う場合に、特異性と感度を高めるために使用されます。
6. ホットスタート PCR: ホットスタート PCR では、低温では不活性となる修飾 DNA ポリメラーゼが使用されます。 これは、PCR の初期段階での非特異的増幅を防止し、複雑なテンプレートを使用する場合に特に役立ちます。
7. 高忠実度 PCR: 高忠実度 PCR では、DNA 複製中のエラーを最小限に抑える校正機能を備えた DNA ポリメラーゼを採用しています。 DNA シーケンスやクローニングなどのアプリケーションには不可欠です。
8. デジタル PCR (dPCR): デジタル PCR はサンプルを何千もの小さな反応に分割し、標的 DNA または RNA 分子の絶対定量を可能にします。 精度が高く、まれな対立遺伝子の検出と定量に使用されます。
9. インバース PCR: インバース PCR は、末端に既知の配列を持つ DNA 断片を増幅するため、既知の配列に隣接する未知の領域を研究するのに役立ちます。
10. コロニー PCR: コロニー PCR は、多くの場合、クローニング実験後に、特定の DNA 断片の存在について細菌コロニーをスクリーニングするために使用されます。
11. オーバーラップエクステンション PCR (オーバーラップエクステンションまたは SOE-PCR によるスプライシング): SOE-PCR は、キメラ DNA 分子を作成したり、重複する配列を持つ DNA 断片を結合することによって部位特異的突然変異誘発を実行したりするために使用されます。
12. 非対称 PCR: 非対称 PCR では、過剰な XNUMX つのプライマーを使用して、ターゲット DNA の XNUMX つの鎖を優先的に増幅します。 DNA 配列決定と遺伝子型解析に使用されます。

これらは、利用可能な多くの特殊な PCR 技術のうちのほんの一部であり、それぞれが特定の研究または診断要件に合わせて調整されています。 研究者は、プロジェクトの性質と取得したい情報に基づいて、適切なタイプの PCR を選択します。